产品货号：
QN0965
中文名称：
Pfu DNA聚合酶
英文名称：
Pfu DNA Polymerase
产品规格：
500U|1kU|10kU
发货周期：
1～3天
产品价格：
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简要说明：
适用范围：
活性定义：
产品组成：
保存：-20℃，有效期1年。
酶贮存液：
50mM Tris-HCl(pH8.2)，0.1mM EDTA，1mM DTT，50% glycerol，其他成分。
质量控制：
注意事项：
反应体系：
相关搜索：Pfu DNA聚合酶，Pfu DNA Polymerase
Pfu DNA聚合酶是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA聚合酶基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白，其分子量为90kD。由于Pfu酶具有3'→5'核酸外切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错配，而传统的Taq酶却不能，其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等虽具有校正功能，但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性，PCR反应中的延伸速度一般为0.5～1kb/min，比Taq酶要低。Pfu酶比Taq酶热稳定性更好，95℃ 1小时仍保持90%以上的活性，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。
适用范围：
用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析（SNP）和末端补平等。
活性定义：
1单位(U) Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃，30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
产品组成：
| 组分 | 500U | 1kU | 10kU |
| Pfu DNA聚合酶(5U/μL) | 100μL | 200μL | 2mL |
| 10×Buffer(含Mg2+) | 1mL | 1mL | 1mL×5 |
保存：-20℃，有效期1年。
酶贮存液：
50mM Tris-HCl(pH8.2)，0.1mM EDTA，1mM DTT，50% glycerol，其他成分。
质量控制：
- SDS-PAGE检测Pfu DNA Polymerase纯度大于99%；
- 经检测无外源核酸酶活性；
- PCR方法检测无宿主残余DNA；
- 能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因；
- 室温存放一周，无明显活性改变。
注意事项：
- PCR反应体系加样时，最后一步加入Pfu DNA Ploymerase，整个过程宜在冰上操作。
- 取Pfu DNA Ploymerase做PCR反应时，请用高压灭菌处理过的吸头。
- 10×Pfu Buffer中含20mM Mg2+，如PCR反应需要较高Mg2+浓度，请另行加入。
- 用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，Tm值在55～80℃之间，引物浓度在0.1～0.5μM之间，比Taq酶略高。
反应体系：
| 成分 | 用量 |
| 模板DNA | <0.5μg |
| 上游引物(10μM) | 1μL |
| 下游引物(10μM) | 1μL |
| 10×Buffer(含Mg2+) | 5μL |
| dNTPs(各2.5mM) | 4μL |
| Pfu DNA聚合酶(5U/μL) | 0.5～1μL |
| ddH2O | 至50μL |
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